Após jejum de oito horas, punção venosa com cateter e repouso de 20 minutos. Coleta da amostra basal para dosar Glicose e ACTH. Administrar via endovenosa 0,10 UI/Kg de Insulina Regular. Coletar amostras de plasma fluoretado e plasma com EDTA nos tempos 15, 30, 45, 60, 90 e 120 minutos. Centrifugar e separar plasma imediatemente após a coleta. Dosar ACTH e GLICOSE em todos os tempos. Enviar as amostras de plasma fluoretado e plasma com EDTA congeladas. Obs: Manter soro glicosado a 50% para infusão venosa lenta, caso a dosagem de glicose for inferior a 25 mg/dL

Uso: diagnóstico diferencial da síndrome de Cushing, síndrome do ACTH ectópico (ex. carcinoma de pulmão, tumor de ilhotas pancreáticas, tumores carcinóides, carcinoma medular de tireóide), doença de Addison, hipopituitarismo e tumores pituitários produtores de ACTH (ex. síndrome de Nelson); avaliação de função adrenal. Valores aumentados: doença de Addison, tumores produtores de ACT, stress, síndrome de Cushing hipofisária. Valores diminuídos: adenoma de glândulas supra-renais, carcinoma de células supra renais. Interferentes: corticosteróides, estrogênios, espironolactona, anfetaminas, álcool, lítio, gravidez, fase do ciclo menstrual, atividade física.